技術(shù)文章
提高氣相色譜靈敏度的方法
主要是使用溶劑濃縮的方法,溶劑濃縮的目的是不使用分流進(jìn)樣仍然可以得到尖銳的峰形,惟有如此,才能獲得更好的靈敏度以及更好的分離度。
溶劑濃縮由兩種方法產(chǎn)生:
第一種是在不分流進(jìn)樣和直接進(jìn)樣時使用:這種方法需要調(diào)節(jié)柱溫箱,與前者不同的地方是溶劑和分析化合物必須同時在進(jìn)樣時在較冷的色譜柱上冷卻凝結(jié);這些凝結(jié)的樣品在色譜柱表面形成“樣品泛濫帶"(flooded zone);當(dāng)溶劑逐漸揮發(fā)時,樣品泛濫帶的面積就逐漸縮小,“樣品泛濫帶"分析物的濃度就漸漸增加。等到溶劑揮發(fā)后,分析物就在很小的柱表面范圍上凝結(jié)。
第二種是當(dāng)不分流進(jìn)樣時,液體的樣品揮發(fā)后,在較冷的色譜柱上冷卻凝結(jié):載氣的體積比液體大很多,所以,當(dāng)樣品冷凝結(jié)時,樣品就濃縮在色譜柱的一個小范圍內(nèi)。所以說不論哪種方法,分析物或是溶劑和分析物必須在柱子的小面積上凝結(jié)。
※影響樣品在色譜柱上凝結(jié)速度的因素有:
色譜柱的初始柱溫,溶劑的揮發(fā)性,還有就是色譜柱固定相的比例。
色譜柱柱溫的初始溫度:
1.基本是最容易也是最快做到的方法,一般說來初始溫度愈低的話,分析物凝結(jié)的愈好。
2.建議初始溫度最好設(shè)在比最快出峰分析物的沸點(diǎn)低攝氏50度左右,溫度保持的時間最好就是非分流的保持時間。
第二個重要的因素:
色譜柱“固定相比例"(phase ratio):
愈低的固定相比例,意味著越厚的膜厚,膜越厚樣品和溶劑越容易溶解在固定相。要改變此因素,也只能試試不同的柱子。這是當(dāng)改變初始溫度不可能達(dá)到的時候使用的方法。
最后一個可以改變的因素就是樣品本身:
大部分時候,樣品本身沒法改變,但是,可以使用不同的溶劑以增加其效果,例如,溶劑的沸點(diǎn)與初始溫度的差別愈大愈好,例如,柱溫初始溫度是攝氏30度時,樣品使用的溶劑是乙酸乙酯(沸點(diǎn)攝氏77.1度)會比使用二氯甲烷溶劑好(沸點(diǎn)攝氏39度)。
GC出廠后它的靈敏度基本上是固定了,我們所能做到的是發(fā)揮出它固有的性能:
1.優(yōu)化H2和Air的比例,使樣品充分離子化;
2.優(yōu)化尾吹氣流量(25~35mL/min),在改善分辨率的同時,使峰變窄變高,也相當(dāng)于改善了靈敏度;
3.保持進(jìn)樣口,F(xiàn)ID 噴嘴和氣路的清潔,定期更換進(jìn)樣墊、襯管和石英棉;
4.用高純度的氣(載氣、H2、Air和尾吹氣),也能使噪音變小,靈敏度也就增加了;
5.用Low Bleeding的毛細(xì)柱,也能使噪音變小,靈敏度也就相應(yīng)增加了。